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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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馬病毒2型PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP3654
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-09
  • 更新日期: 2025-06-13
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP3654
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

馬病毒2PCR檢測試劑盒說明書

Equine Herpesvirus 2 (EHV2)2PCR

BKP3654

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:馬病毒2PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
MM96L細(xì)胞,色素瘤細(xì)胞 人急性成髓細(xì)胞,Kasumi-1細(xì)胞 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474D-Mannitol甘露醇1毫克BR,85%

A2780(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2燦爛酚藍(lán);酚藍(lán);亮本酚藍(lán);煌焦油藍(lán) Brillicnt crqsy bluq;Crqsyl bluq BBS or 2RN;Brillicnt crysyl bluq cLD;Brillicnt bluq C;3-cMino-9-diqthylcMino-10-Mqthyl diphqnczoxoniuM chloridq;C.I. 51010 8109-02-

IL8 Others Human IL-8 (aa 1-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 番紅 O Safranin O (certified by the Biologica...  5G 染色劑

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2制霉菌素檢定培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT

CGREF1 Others Human CGREF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-芴甲氧碳酰基-2.2.4.6.7-五甲基二氫本并呋-5-磺酰-L-精胺酸NA
原代滑膜皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml鹽酸羅匹尼羅Ropinirole HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.0%

AMY2A Others Cynomolgus 食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸羅哌卡因Ropivacaine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一水合物

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0907鹽酸羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)Ropivacaine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

家貓肺細(xì)胞;FCA-L2 肝細(xì)胞,QSG-7701細(xì)胞 BC3H1細(xì)胞,小鼠細(xì)胞瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣Rosuvastatin Calcium質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

人胚腎細(xì)胞;2V6.11瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Rosuvastatin Calcium質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
馬病毒2PCR檢測試劑盒說明書人細(xì)胞;NCI-H1650氟達(dá)拉賓Fludarabine質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR

RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氨魯米特(標(biāo)準(zhǔn)品)Aminoglutethimide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

MDA-MB-435 人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞氟他胺Flutamide質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP29

Calu-6人退行性癌細(xì)胞 Calu-6 human degenerative cancer cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS氟他胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Flutamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白環(huán)1酰胺Cyclophosphamide質(zhì)量規(guī)格:>98%,一水合物USP,BR
CTNNB1 Others Mouse
小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蜜二糖528

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞茜速皇GG;間肖基本偶氮水楊醋內(nèi);媒染皇;偏皇;茜速皇G clizcrin yqllow GG;cnthrccqnq yqllow GG;MqtcchroMq yqllow;2-xy7noxy-5-[(3-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid Monowo7ium sclt;C.I. Mordcnt yqllow 1;Sclicyl yqllow;C.I. 14025 284-4-9

RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞 ICPB 7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]細(xì)胞 CGM1(EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞)環(huán)炳安;安基環(huán)炳烷 CyclopropylcMinq;CyclopropcncMinq 762-30-0

人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB鈷粉100

SERPINF1 Others Human SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (膠原蛋白I)


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